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硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（Fluid Thioglycollate Medium）是 Brewer 于1940 年發(fā)明，自20 世紀(jì)50 年代起，國(guó)內(nèi)外藥典陸續(xù)將其收錄，用于藥品的無(wú)菌檢查。1977 年版《中國(guó)藥典》無(wú)菌檢查項(xiàng)下，將硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基作為選擇性培養(yǎng)基列入，并注明用于汞砷類化合物的無(wú)菌檢查。1985 年版《中國(guó)藥典》，硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基收載于無(wú)菌檢查項(xiàng)下，培養(yǎng)基的名稱為“需氧、厭氣菌培養(yǎng)基”。在此后的各版《中國(guó)藥典》及《中國(guó)生物制品規(guī)程》，均收載硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基用于無(wú)菌檢查。
雖然硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基存在一定的局限性，其不能使所有的梭狀芽孢桿菌生長(zhǎng)，但之所以能夠沿用至今，是因?yàn)槠渚哂胁豢商娲木薮髢?yōu)勢(shì)。即其能在普通有氧環(huán)境下提供厭氧條件，使需氧菌和厭氧菌均能夠生長(zhǎng)良好，并易于觀察結(jié)果，這提供了一般實(shí)驗(yàn)室難以達(dá)到的厭氧培養(yǎng)條件。
我們先看一下硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基的配方：
酪胨（胰酶水解）)和L-胱氨酸:是由酪蛋白經(jīng)過(guò)胰酶水解后，將大分子的酪蛋白分解為?、胨、肽及多種氨基酸。由于原材料是從奶中提取的酪蛋白，質(zhì)量穩(wěn)定，氨基酸種類多，優(yōu)于一般的胨，與L-胱氨酸構(gòu)成細(xì)菌成長(zhǎng)所需的氮源。
葡萄糖 : 提供微生物生長(zhǎng)所需的碳源。自然界中大多數(shù)微生物都能利用葡萄糖，由于細(xì)菌代謝過(guò)程中分解代謝葡萄糖產(chǎn)酸，培養(yǎng)及加熱滅菌時(shí)葡萄糖被破壞會(huì)產(chǎn)生有毒物質(zhì)，因此應(yīng)注意其用量及加熱次數(shù)。
酵母浸出粉 : 酵母浸出粉是由氨基酸類、肽類、水溶性維生素及酵母多糖、酵母核酸組成的一種混合物。它不僅能補(bǔ)充氮源，還能提供微生物生長(zhǎng)的各種維生素及氨基酸。
（2）無(wú)機(jī)鹽類
氯化鈉及酪胨、酵母浸出粉中含有的等無(wú)機(jī)離子，構(gòu)成細(xì)菌細(xì)胞的組織物質(zhì)，具有影響酶活性及調(diào)節(jié)滲透壓的作用。
（3）厭氧（還原）環(huán)境的形成與保持
硫乙醇酸鈉或硫乙醇酸: 在培養(yǎng)基中的主要作用有兩方面，一是與L-胱氨酸、葡萄糖有降低氧化還原電位的作用，使深部氧化還原電位較低，因而維持培養(yǎng)基下層的厭氧條件，有利于厭氧菌的生長(zhǎng)。二是具有鈍化砷和汞類藥物及防腐劑的抑菌作用。當(dāng)汞鹽等物質(zhì)存在時(shí)，它與培養(yǎng)基中的SH 基結(jié)合，抑制了細(xì)菌的生長(zhǎng)。當(dāng)培養(yǎng)基中有硫乙醇酸鹽時(shí)，培養(yǎng)基內(nèi)SH 基增多，消除汞鹽等抑菌現(xiàn)象，有利于細(xì)菌的生長(zhǎng)。
瓊脂 : 在培養(yǎng)基中加入少量瓊脂，可減少液面流動(dòng)，降低氧的吸收，維持培養(yǎng)基底部的還原電位，有利于厭氧菌的生長(zhǎng)。但應(yīng)選用透明度好的瓊脂，以免影響判斷結(jié)果。
（4）氧化還原指示劑
刃天青為氧化還原指示劑，新鮮制備的培養(yǎng)基，溫度較高，培養(yǎng)基管的上部與氧接觸，刃天青呈藍(lán)色，而中下部培養(yǎng)基呈無(wú)氧狀態(tài)，刃天青還原為無(wú)色，當(dāng)培養(yǎng)基放置后，培養(yǎng)基與空氣接觸，有溶氧，刃天青被氧化，變?yōu)榉奂t色。
配制硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基時(shí)，除按照藥典規(guī)定的方法制作外，還需要注意以下問(wèn)題：
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（1）硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基有0.075 %的瓊脂，在滅菌后，培養(yǎng)基應(yīng)呈現(xiàn)無(wú)渾濁狀態(tài)，如果放置一段時(shí)間，出現(xiàn)輕微渾濁，尤其是放入冰箱后，渾濁現(xiàn)象更加明顯。渾濁程度一方面可能與培養(yǎng)基用的瓊脂質(zhì)量有關(guān)，另一方面也可能與滅菌是否徹底有關(guān)，具體情況應(yīng)具體分析。隨著目前無(wú)菌檢查對(duì)培養(yǎng)基的質(zhì)量要求越來(lái)越高，包括北京三藥在內(nèi)的國(guó)內(nèi)幾家培養(yǎng)基供應(yīng)商在這方面的研究有質(zhì)的突破，不僅澄明度高，氧化層也能維持穩(wěn)定。
（2）如果存在大體積配制，然后分裝到小的容器中的情況，應(yīng)注意分裝的均一性。
（3）培養(yǎng)基在滅菌后至使用過(guò)程中取放應(yīng)避免搖晃，以免培養(yǎng)基因振動(dòng)而進(jìn)入氧氣，影響培養(yǎng)基的使用，接種操作應(yīng)動(dòng)作迅速、敏捷。
（4）在接種前，如果氧化層（粉紅色）的高度超過(guò)培養(yǎng)基深度的1/3，須經(jīng)100℃水浴加熱至粉紅色消失（不超過(guò)20 min），迅速冷卻，只限加熱一次，并防止被污染。
（5）硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基含有較多的還原性物質(zhì)，在滅菌過(guò)程中，應(yīng)注意在無(wú)菌保證的前提下，避免過(guò)熱，以防止PH降低到6.9以下的可能。
（6）供試品加入到硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中之后，可能出現(xiàn)瓊脂析出的情況，這個(gè)應(yīng)根據(jù)調(diào)查情況具體分析，并采取有效措施。
原文鏈接：https://mp.weixin.qq.com/s/LXlRQcZnpuxu_CWLNSvjJg
